Estudo da vida de prateleira do Soro Controle Positivo componente do kit de Hemaglutinação Indireta para Toxoplasmose

BARCELOS, A.L.R.^1,2; CAMARGO, M.A.¹; FUKUDA, D.S.¹; REIS, D.C.V.¹; MESTRINER, C.A.^1,2.
¹Departamento de Pesquisa e Desenvolvimento Wama Diagnóstica; ²UNICEP-São Carlos.

Introdução

O estudo do shelf-life ou vida de prateleira de um produto é uma importante ferramenta para determinar a melhor condição de armazenamento e fundamentar os testes acelerados de validade. Para tanto, pode-se utilizar o método de Arrhenius. Em kits de diagnóstico in vitro esse estudo é fundamental, uma vez que o diagnóstico laboratorial correto depende da estabilidade do kit utilizado.

Objetivo

O objetivo deste trabalho foi realizar o estudo do shelf-life do soro controle positivo do kit de hemaglutinação indireta de toxoplasmose, devido substituição da matéria prima humana pela animal e, assim, determinar a melhor condição de armazenamento e o prazo de validade do mesmo.

Para determinar a ordem de reação da degradação do soro controle positivo, os dados brutos obtidos para cada temperatura foram convertidos utilizando-se as seguintes soluções analíticas:

Os resultados transformados pelas três equações foram lançados em um gráfico de tempo em função da reatividade da amostra (título). A identificação do maior coeficiente de determinação (R²) para cada temperatura definiu a ordem da reação em pseudo-ordem zero, um e dois; e também permitiu definir os coeficientes angulares das retas formadas, que correspondem às constantes de velocidade (k) de cada temperatura.

A análise das constantes de velocidade (k) de cada temperatura permite identificar a temperatura ideal de armazenamento, através do menor valor de k, e a melhor temperatura, dentre as estudadas, para o desenvolvimento do estudo acelerado de validade, através do maior valor de k.

As constantes de velocidade (k) também foram utilizadas para obter o fator de aceleração (α), utilizado na definição do prazo de validade do produto, através da razão entre os valores do maior e do menor k e, para plotar um segundo gráfico do ln(k) versus o inverso das temperaturas estudadas (1/T), do qual se obtém a equação da reta formada, análoga à Equação de Arrhenius, que permite fazer previsões da validade do produto em temperaturas não estudadas.

Juntamente com a análise de reatividade, as características físicas do produto, importantes sob o ponto de vista comercial, também foram avaliadas.

Resultados

As características físicas analisadas do produto mostraram que não houve alteração de cor, odor ou consistência do mesmo. O soro mantido a 70°C não foi analisado com relação a reatividade e as características físicas, pois o mesmo se degradou rapidamente impedindo a coleta de dados.

O valores brutos de cada temperatura transformados nas três equações descritas anteriormente mostraram que o maior valor de R² foi obtido com a primeira equação em todas as temperaturas, onde conclui-se que a reação de degradação do soro controle positivo é da pseudo-ordem zero. Do gráfico de pseudo-ordem zero foram extraídos os valores de k (Tabela II) que mostraram que 5ºC é a temperatura ideal para armazenar o soro controle positivo e, 50ºC temperatura mais indicada para realizar os estudos acelerados de validade.

O prazo de validade do produto foi estimado com base no fator de aceleração (α), obtido através da razão entre os valores das constantes de velocidade das temperaturas de interesse (k50˚C /k5˚C = α), resultando em um prazo de validade estimado em 3 anos e 6 meses, uma vez que o mesmo se manteve estável 52 dias quando submetido à temperatura 50ºC. Entretanto, o tempo de 52 dias necessário para definir o prazo de validade do produto, por ser muito extenso, seria inviável para a indústria uma vez que o lote produzido permaneceria em análise por muito tempo na empresa resultando em um aumento do estoque. Desta forma, buscou-se através da equação de Arrhenius, obtida do gráfico ln(k) versus 1/T,uma temperatura que se adequasse à necessidade comercial da empresa. Os resultados indicaram que submeter o produto a 65ºC por 20 dias corresponde a uma validade de 3 anos e 6 meses quando armazenado a temperatura de 5ºC.

Conclusão

O presente trabalho mostra que o estudo do shelf-life de um produto é uma importante ferramenta que permite conhecer os mecanismos de reação de degradação deste produto e estipular um prazo de validade aproximado para o mesmo. Além disso, esse estudo mostra-se indispensável para indústria de diagnóstico, pois também permite direcionar os testes acelerados de estabilidade de acordo com as necessidades comerciais.

Com relação à validade do produto, o trabalho mostrou que ele possui uma validade extensa, o que possibilita a produção de lotes maiores, reduzindo as perdas relativas às sobras de pequenos lotes e manutenção de representantes nos estoques de controle de qualidade e retenção. Os resultados encontrados permitem afirmar que a temperatura 65ºC é a ideal para o desenvolvimento dos testes acelerados de estabilidade, sob o ponto de vista comercial, uma vez que requer a permanência de amostras do produto por apenas 20 dias em estufa.

Bibliografia

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